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磷鎢酸負染色

磷鎢酸負染色又稱磷鎢酸陰性染色,是相對于普通染色(稱正染色)而言的。負染色技術是一種製備電子顯微鏡樣品圖像呈現複反差的技術,用於觀察樣品中的顆粒性物質或生物大分子。用金屬鹽對鋪展在載網上的樣品進行染色,使整個載網都鋪上一層重金屬鹽,而有凸出顆粒的地方則沒有染料沉積。染色後,在電鏡下觀察時,被觀察的對象為亮的,背景為暗的。

磷鎢酸負染色首先由Hall在1955年提出,Hall在病毒研究中用磷鎢酸染色後,發現圖像的背景很暗,而病毒象一個亮晶的"空洞"被清楚地顯示出來。在超薄切片的染色中,染色後的樣品電子密度因染色而被加強,在圖像中呈現黑色。

乳滴用磷鎢酸負染圖磷鎢酸負染色電鏡圖

磷鎢酸負染色液

磷鎢酸負染色液是一種生物染色液,有多種不同規格,包括磷鎢酸負染色液(2%)、磷鎢酸負染色液(3%)和磷鎢酸負染色液(5%)等。

磷鎢酸負染原理

磷鎢酸負染原理是用重金屬鹽——磷鎢酸對鋪展在載網上的樣品進行染色;吸去染料,樣品乾燥後,樣品凹陷處鋪了一薄層重金屬鹽,而凸的出地方則沒有染料沉積,從而出現負染效果。

磷鎢酸負染液配製

磷鎢酸負染液的配製通常以鎢酸鈉和磷酸為原料制得,並且要加酸化劑氫氯酸HCl,用雙蒸水或磷酸緩衝液配製成1%~3%的溶液,使用時應用1mol/L氫氧化鈉溶液將磷鎢酸負染色液的pH值調至6.4~7.0或實驗所需的值。

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